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三大常用ELISA實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)

2019-07-26 [1881]

今日,我司技能專員為您解析ELISA試驗(yàn)三大常用方法的優(yōu)勢(shì)與下風(fēng),一同跟著研域(上海)小編來(lái)看看吧!總所周知,ELISA試劑盒法可分為多種類型測(cè)定,是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技能。
一、直接法
    將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反應(yīng)。
下風(fēng):試驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)前進(jìn)。
二、ELISA試劑盒間接法
此測(cè)定方法與直接法相似,不同在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。
優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種選擇能做不相同的測(cè)定分析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反應(yīng)性。
下風(fēng):交互反應(yīng)發(fā)作的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法
被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢查抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反應(yīng)或比賽相同的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢(shì):高活絡(luò)、高專一性,抗原無(wú)須事前純化。
下風(fēng):抗原一定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
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